Caldo Cerebro Corazón
FUNDAMENTO
Es un medio líquido que permite el crecimiento de microorganismos considerados generalmente como muy difíciles de cultivar, en él los gérmenes mantienen su virulencia, antigenicidad y otras características serológicas.
COMPOSICIÓN
Infusión de cerebro de ternera 20.0g
Infusión corazón de res 25.0g
Peptona 10.0g
NaCl 5.0g
Fosfato disódico 2.5g
Glucosa 2.0g
Agua destilada 1 000ml
PREPARACIÓN
Para su preparación se disuelven los ingredientes en un litro de agua destilada y con ayuda del Baño María, enfriar a 45°C y controlar el pH a 7.4. Repartir en tubos 10ml y autoclavar a 121°C por 15 minutos. A la fórmula anterior pueden agregarse 16g. de agar agar y entonces será necesario autoclavar y repartir en placas Petri estériles, 20ml por placa.
PROCEDIMIENTO
Pueden sembrarse por cualquiera de los métodos ya conocidos.
Fuente: Medios de Cultivo en Microbiología Manual de Laboratorio. UNMSM. M. Mendo Rubio.
Caldo Extracto de Malta
FUNDAMENTO
Es un medio para demostración, aislamiento y numeración de hongos, especialmente de levaduras y mohos, en diversos materiales de investigación.
COMPOSICIÓN
Extracto de malta 17.0g
Peptona de harina de soya 3.0g
Agua destilada 1000.0ml
Ph 4.8 +/- 0.2
PREPARACIÓN
Disolver 17.0g / litro, distribuir y esterilizar cautelosamente al autoclave (10min a 115°C).
Fuente: Medios de Cultivo en Microbiología Manual de Laboratorio. UNMSM. M. Mendo Rubio.
Agar Extracto de Malta
FUNDAMENTO
Es el caldo extracto de malta pero adicionado de Agar Agar. Es un medio para demostración, aislamiento y numeración de hongos, especialmente de levaduras y mohos, en diversos materiales de investigación y para cultivos de cepas de ensayo para la determinación microbiológica de vitaminas.
COMPOSICIÓN
Extracto de malta 30.0g
Peptona de harina de soya 3.0g
Agar-agar 15.0g
PREPARACIÓN
Disolver 48g/l, esterilizar cautelosamente al autoclave ( 10min a 121°C), pH 5.6 +/-0.1. Para hacer descender el valor del pH se funde el medio de cultivo estéril y se ajusta el nuevo valor del pH mediante solución ( esterilizado por filtración ) de ácido tartárico al 5%. Después de estas condiciones: No volver a calentar el medio de cultivo.
Para la numeración de gérmenes, puede ajustarse el medio de cultivo a un pH de 3-5 aproximadamente, con el fin de reprimir el crecimiento de la flora bacteriana.
Fuente: Medios de Cultivo en Microbiología Manual de Laboratorio. UNMSM. M. Mendo Rubio.
Agar Sangre
FUNDAMENTO
El agregado de sangre permite el aislamiento y cultivo de microorganismos sumamente exigentes y fastidiosos. Además permite observar el tipo de degradación (hemólisis) del hematíe.
COMPOSICIÓN
Como medio base pueden utilizarse el Agar nutritivo, el Agar Muller Hinton, el Agar Tripticasa Soya, el Agar Casoy.
PREPARACIÓN
Estos medios convenientemente esterilizados al autoclave se enfrían a 45°C y se agrega sangre desfibrinada u oxalatada estéril, en una concentración de 5%. La sangre puede ser obtenida de caballo, carnero, conejo, inclusive humana y se reparte en placas petri estériles.
PROCEDIMIENTO
Se siembran las muestras por cualquiera de los métodos conocidos y se incuba a 37°C durante 24 horas.
INTERPRETACIÓN
En este medio crecen los microorganismos Gram positivos y Gram negativos, las colonias de la mayoría de los microorganismos son blanquecinas, regulares. En el caso de streptococos estas colonias son pequeñas y pueden observarse el tipo de hemólisis producido. Así, se observa una zona totalmente clara alrededor de la colonia, se trata de una Beta-hemólisis; por el contrario al observar una zona de color verde o ligeramente verde se trata de Alfa-hemólisis.
De acuerdo con Harrison y Mc Cauce, los términos alfa y beta hemólisis son términos cuyo significado depende si es que se usan con referencia a los streptococos o a los stafilococos. Es decir, que para los stafilococos, la alfa hemólisis produce zonas claras y la beta hemólisis produce zonas ligeramente oscura.
Fuente: Medios de Cultivo en Microbiología Manual de Laboratorio. UNMSM. M. Mendo Rubio.
Agar Chocolate
FUNDAMENTO
Este medio se utiliza para el aislamiento de gérmenes que necesitan asimilar rápida y fácilmente los factores X y V presentes en la sangre.
El factor X es la hematina y está constituida por el núcleo HEM. Este factor se libera cuando los hematíes sufren la acción del calor, liberándose también la hemoglobina. El factor V no se destruye por el calor.
COMPOSICIÓN
Al igual que para el agar sangre, se utiliza como medio base al Agar Casoy, Agar TSA, Agar Nutritivo, etc.
PREPARACIÓN
Sobre el medio base licuado y mantenido a 70°C se agrega sangre fresca y estéril (5%) desfibrinada u oxalatada y se reparte en placas de Petri estériles.
PROCEDIMIENTO
Se siembra la muestra por cualquiera de los métodos anteriores y se incuba a 37°C durante 24 horas. Para el aislamiento de gonococos es necesario incubar en una atmósfera de CO2 con suficiente humedad.
Fuente: Medios de Cultivo en Microbiología Manual de Laboratorio. UNMSM. M. Mendo Rubio.